，， 、、 ｝， ‘ 塞离消’对鱼类几种常见致病菌的杀灭效果 ｏ孟思好ｔ孟长明， 陈昌福。 ｉ ｌ （１、河南省新 康 消童 限公 ，河南新乡、４～５—３７—００；一一一 一 ２、华中农业大学水产学院，武汉４３００７０） 农业部渔用药品临床试验基地（华中农 ３．ＯｍＬ菌浓度约为ｌ×ｌＯＳｃｆｕＩｍＬ的供试 业大学）受理了河南省新乡市康大消毒剂有 菌活菌液，最后定量添加“菌毒消”原 限公司送检的”菌毒消”的临床试验申请，根 液，使各烧瓶内水体中”菌毒消”的终浓度 据中华人民共和国《兽药管理条例》、农业部 分别达到０．１５ｍＬ／Ｌ，０．２０ｍＬ／Ｌ，０．２５ｍＬ／Ｌ， 《新渔药临床试验管理办法》和农业部《新渔 ０．３０ｍＬ／Ｌ．０．３５ｍＬ／Ｌ，０．４０ｍＩ／Ｌ，０．４５ｍ１．／Ｌ和 药临床试验技术规范》的要求，就”菌毒消”对 ０．５０ｍ１．／Ｌ。轻摇烧瓶，使菌体和药液均匀地分 水体中水产养殖动物的４种常见致病菌的８ 布在水中。另外分别设置不添加菌液或者药 个菌株进行杀灭试验。 液的烧瓶作对照组。添加药液结束２０分钟 １材料与方法 后．检测灭菌效果。 １．１供试药物及其原液的配制 １．４灭菌效果的检浸４ 用于本试验的“菌毒消”由河南省新乡市 在无菌条件下．从各烧瓶中取０．１０ ｍＬ 康大消毒剂有限公司生产。生产批号为２０１ １ 水．涂抹在用ＢＨＩＡ制备的平板上，在２５℃条 ０１０３。酚含量为４２．Ｏ％一５０．Ｏ％。临用前打开包 件下培养４８ ｈ后，计数各平皿中的菌落数 装袋并准确称取ｌＯ．ＯｍＬ“菌毒消”溶解于 量．根据菌落的生成状况，判断“菌毒消”的灭 １００．ｉｆｎａｌ蒸馏水中，摇匀，即为“菌毒消”的供 菌效果。 试原液。 ２结果 １．２供试茵株及其培养 在不同水温和水质条件下。各种浓度的 柱状嗜纤维菌（Ｃｙｔｏｐｈａｇａ ｃｏｌｕｍｒｕ￣）的 “菌毒消”对ｃｃ卿『ｌｎ 的杀灭效果如表Ｉ ｓＣ一２（简称Ａ，下同）和ＧＣＲ－９０６１（Ｂ），嗜水 表１不同水温和水质条件下“菌毒消”对 气单胞菌（Ａｅｒｏｍｏｎａｓ ｈｙｄｒｏｐｈｉｌａ）的Ｂｓ一６（ｃ） Ｃ．ｃｙｔｏｐｈａｇａ的杀菌效果 和ＺＨＢ一７（Ｄ），迟缓爱德华氏菌（ＥｄｗａｒｄｓｉＵａ 水 采温 菌 “茵毒消”的浓度（ｍ【，Ｌ） ｔａｒｄａ）的ＥＦ—ｌ（Ｅ）和Ｅｔ—ｌ２（Ｆ）和鳗弧菌 质 （℃） 种 ０．１５ ０．２０ ０．２５ ０．３０ ０＿３５ ０．４０ ０．４５ ０．５０ （Ｖｉｂ￣ａ，，ｇｕｌｔｔａｎ￣）的．Ｉ－０一ｌ（Ｇ）和Ｋ一３（Ｈ） １０ Ａ ＋ ＋ ＋ ± 等４种菌共８个菌株用作本试验的供试菌 自 Ｂ ＋ ＋ ＋ ± 株。将冷冻保存的菌株接种在脑心浸液琼脂 来 ２０ Ａ ＋ ＋ ± 培养基（ＢＨＩＡ，Ｄｉｆｅｏ）上，２８℃培养３６ ｈ，以灭 Ｂ ＋ ＋ ± 水 Ａ ＋ ＋ ± 菌生理盐水洗下菌苔，离心集菌，低温保存备 ３０ Ｂ ＋ ＋ 士 用。 ．ｌＯ Ａ ＋ ＋ ＋ 士 １＿３灭菌处理 Ｂ ＋ ＋ ＋ ± 将盛有２９７ｍＬ灭菌自来水或养殖池水 池 采 ２０ Ｂ Ａ ＋ ＋ 土 的三角玻璃烧瓶，分别置于ｌ０℃。２０℃和３０℃ ＋ ± 的恒温水浴锅内。对每个烧瓶中添加 ３０ Ａ ＋ 士 Ｂ ＋ ± 漓紫致雷柏南２０１１～，７ —７７— 所示。由表１可以看出．当水温在２０℃以上 时，０．３０ｍＬ／Ｌ的”菌毒消”即可以杀死ｅ 在不同水温和水质条件下．各种浓度的 “菌毒消”对Ｅ．ｔａｒｄａ的杀灭效果如表３所示 由表３可以看出，当水温在２０℃以上时． ０．３０ｍＬ／Ｌ的“菌毒消”即可以杀死Ｅ．ｔａｒｄａ的 ２个菌株。而水温只有１０℃时．“菌毒消”的浓 ｃｏｌｕｍｎａｒｉｓ的２个菌株。而水温只有ｌＯ℃时． “菌毒消”的浓度要达到Ｏ．３５ｍＬ／Ｌ，才能将菌 体杀死。 表２不同水温和水质条件下“菌毒消” 度要达到０．３５ｍＬ／Ｌ，才能将菌体杀死。 对Ａ．ｈｙｄｒｏｐｈｉｌａ的杀菌效果 表４不同水温和水质条件下“菌毒消” 水 水温 菌 “茵毒消”的浓度（ｍＬ／Ｌ） 对Ｖ．ａｎｇｕｉｌｌａｒｕｍ的杀菌效果 质 （℃） 种 ０．１５ ０．２０ Ｏ．２５ Ｏ－３０ ０＿３５ ０．４０ ０．４５ Ｏ．５Ｏ 水 水 茁 “茼毒消”的浓度（Ｈｄ几） １０ Ｃ ＋ ＋ ＋ ± 质 温 种 自 Ｄ ＋ ＋ 士 （℃） Ｏ．１５ Ｏ．２０ ０．２５ ０．３ｏ Ｏ．３５ ０．４０ ０．４５ Ｏ．５Ｏ 来 ２０ Ｃ ＋ ± Ｇ ＋ ＋ 士 Ｄ ＋ ± ｌ０ 水 Ｃ Ｈ ＋ ＋ ＋ 土 ３０ ＋ ± 自 Ｄ ＋ 士 采 ２０ Ｇ ＋ ± １０ Ｃ ＋ ＋ ＋ ± 水 Ｈ ＋ ＋ ± Ｄ ＋ ＋ ＋ ± Ｇ ＋ ± 池 Ｃ ＋ ＋ 士 ３０ 水 ２０ Ｄ Ｈ ＋ 土 ＋ 士 ３０ Ｃ ± Ｇ ＋ ＋ ± １０ Ｄ ＋ ± Ｈ ＋ ＋ ＋ ± 在不同水温和水质条件下，各种浓度的 池 Ｇ ＋ ＋ 士 水 ２０ “菌毒消”对Ａ．ｈｙｄｒｏｐｈｉｌａ的杀灭效果如表２ Ｈ ＋ ＋ ± 所示。由表２可以看出，当水温在２０℃以上 Ｇ ＋ ＋ ± ３０ 时，０．３０ｍＬ／Ｌ的“菌毒消”即可以杀死Ａ． ｙ— Ｈ ＋ 士 ｄｒｏｐｈｉｌａ的２个菌株。而水温只有１０％时， 在不同水温和水质条件下，各种浓度的 “菌毒消”的浓度要达到０．３５ｍＬ／Ｌ．才能将菌 “菌毒消”对Ｖ．ａｎｇｕｉｌｌａｒｕｍ的杀灭效果如表４ 体杀死。 所示。由表４可以看出，当水温在２０℃以上 表３不同水温和水质条件下“菌毒消” 时．０．３０ｍＬ／ｍＬ的“菌毒消”即可以杀死Ｅ．ｔａｒ－ 对Ｅ．ｔａｒｄａ的杀菌效果 如的２个菌株。而水温只有１０￣Ｃ时，“菌毒 水 水温 菌 “茵毒消”的浓度（ 几） 消”的浓度要达到Ｏ．３５ｍＩＪＬ，才能将菌体杀 质 （℃） 种 Ｏ．１５ Ｏ．２Ｏ Ｏ．２５ Ｏ．３Ｏ Ｏ－３５ ０ ４０ ０．４５ Ｏ．５Ｏ 死。 Ｅ ＋ ＋ ± ３讨论与结论 １０ 自 Ｆ ＋ ＋ ＋ 士 从对鱼类的４种常见致病菌８个菌株 泉 ２０ Ｅ ＋ 土 的杀灭效果可以看出，“菌毒消”的杀菌作用 水 Ｆ ＋ ± 受水温的影响而与水质没有明显的关系。而 Ｅ ＋ ＋ ± ３０ 且对４种致病菌的杀灭作用无选择性，当水 Ｆ ＋ 士 Ｅ ＋ ± 温为１０ 时．杀菌浓度要达到０．３５ｍｌｄＬ，而 ｌＯ Ｆ ＋ ＋ ± 当水温上升到２０℃时，０．３０ｍＬ／Ｌ的浓度即可 池 Ｅ ＋ ± 将菌体全部杀灭。由此看来，“菌毒消”对鱼 水 ２０ Ｆ ＋ ＋ ± 类的几种致病菌的杀灭效果是比较好的，当 Ｅ ＋ ＋ ± 然．本试验结果还有待在养殖池塘中的应用 ３０ Ｆ ＋ ＋ ± 验证。 ～７８一 漓案致富拍南２０１１—１７