异嗜性抗体对免疫检测结果的影响

异嗜性抗体（Heterophil antibody，HA）是由已知的或未知的抗原物质刺激⼈体产⽣的⼀类具有⾜够滴度、能与多个物种的免疫球蛋⽩发⽣相对弱的结合的多重特异性的免疫球蛋⽩。这种抗体能和原抗原毫⽆关系的抗原起反应,这种与被检物质化学结构不同但活性相似的物质被称之为异嗜性抗体。异嗜性抗体可以与许多动物免疫球蛋⽩的⽚段结合，⼲扰实验,使测定结果与临床表现不符，导致错误结果出现。

HA的特性：HA属⼈体内源性抗体，具有相对稳定的化学结构，分⼦量约160kD，由于其分⼦量较⼤，不易通过肾⼩球滤过膜，因此HA在正常情况下通常存在于⾎液中⽽不会存在尿液中。HA是IgG亚类中较弱的抗体，可与许多动物免疫球蛋⽩的Fc和Fab表位结合， ⽽不与抗原结合位点结合。根据HA结合动物免疫球蛋⽩的部位，可以将其分为两类，⼀类是可以结合⼭⽺、⽼⿏、⼤⿏、马及⽜IgG的Fab部位，另⼀类是可以识别⽼⿏、马、⽜和兔⼦的免疫球蛋⽩的Fc段。不同物种的Fab⽚段相似，所以HA在⽜、⽺、马、豚⿏、⿏和猴免疫球蛋⽩间存在的交叉反应，⿏抗体表现得特别强烈，⽽兔抗体与其它物种发⽣的交叉反应少见。

HA对检测项⽬的⼲扰：ＨＡ可以与许多动物免疫球蛋⽩Ig的Fc、Fab和F(ab)’２部位上的表位结合，模拟被测抗原的免疫活性，同时结合捕获抗体、标记抗体或标记抗原⼲扰实验。根据⽂献报道，发现HA对多种组分的测定存在⼲扰，见下表：ＨＡ对检测项⽬的影响免疫项⽬分类 内分泌类肿瘤标志物

⼼脏⽣物标记物特异的抗细菌／病毒抗内分泌腺体抗体其他

假性升⾼

促甲状腺素;游离T3;游离T4;⼈绒⽑膜促性腺激素;甲状旁腺激素;促黄体⽣成激素;泌乳素;⽪质醇＊;抑制素Ａ;

降钙素；癌胚抗原；CA125；前列腺特异性抗 原；游离前列腺特异性抗原;甲胎蛋⽩;

肌钙蛋⽩；肌红蛋⽩；肌酸激酶-MB;⼈类免疫缺陷病毒甲状腺球蛋⽩＊

嗜铬粒蛋⽩A；类胰蛋⽩酶;Ｃ反应蛋⽩;⼲扰素;胃泌素;α-球蛋⽩

注：＊为假性降低结果，余为假性增⾼

⽬前部分免疫试剂抗体来源于实验动物，因此，体内含HA的患者在进⾏免疫⾎清学试验时，HA可与试剂抗体结合⽽导致⼲扰。临床上被经常使⽤的夹⼼法和竞争法是主要的被⼲扰⽅法。双抗体夹⼼法中HA抗体影响免疫反应主要有两种⽅式：⽅式⼀、充当被测抗原的⾓⾊，同时结合捕获抗体和标记抗体，使结果出现假性增⾼。⽅式⼆、不形成桥梁，但分别与捕获抗体或者标记抗体结合，抑制被测抗原被试剂抗体识别，使结果出现假性降低，见图1。图1、HA对双抗原夹⼼法的影响

在竞争法中，HA抗体影响免疫反应主要有两种⽅式：⽅式⼀、像夹⼼法⼀样，同时结合捕获抗体和标记抗原，使结果出现假性减低。⽅式⼆、同时取代被测抗原和标记抗原，只与捕获抗体结合，使结果出现假性增⾼，见图2。图2、HA对竞争法的影响HA⼲扰的去除⽅法：

１、稀释法：部分免疫检验试剂中添加了吸收异种抗体的成分，如果样本HA浓度含量不是很⾼，且它所造成的⼲扰不是很⼤时，稀释法是可以减少它的⼲扰，但不能够完全消除。2、物理化学技术：可通过超速离⼼、样本加热、凝胶过滤或⾊谱、三氯⼄酸沉淀、聚⼄⼆醇（PEG）、巯基抗原和清洁剂或增加固定蛋⽩Ａ和蛋⽩Ｂ来消除Ig⽚段降低⼲扰。

3、阻滞剂：利⽤⾮特异性和特异性阻断剂与HA结合从⽽达到减少⼲扰。特效阻滞剂主要有Ig抑制试剂和HA阻滞试剂,⼀般为⿏单克隆抗体。⾮特异阻滞剂，⾼浓度的⾮特异性Ig来阻⽌HA的⼲扰，如⿏单克隆抗体、⽜和⿏⾮特异Ig,。

4、利⽤与HA低反应性的物质：可使⽤⾮Ig亲和蛋⽩、特异的兔Ｆ(ab’) ２⽚段等作为固相抗体或酶标抗体，减少与 HA结合的机会。

5、使⽤不同的测定⽅法：利⽤不同⼚家⽣产的单克隆抗体存在的差异，减低体内HA的⼲扰。

尽管对异嗜性抗体的研究有了很⼤的进步，但因其对于很多的不同的结合位点都有亲和⼒，到⽬前为⽌还没有⼀种⽅法可以彻底消除HA的⼲扰。在⽇常⼯作中，需要对所使⽤试剂的特性，特别是⼲扰因素进⾏必要的了解和验证，以确定试剂在哪些情况下可能会出现⼲扰。同时在出现检验结果与临床不符时，应及时与临床联系和沟通，运⽤多种技术和⽅法并结合临床给出最终结果。

【参考⽂献】

[1]韦维.异嗜性抗体在免疫测定中⼲扰的研究进展[J].国际检验医学杂志 2010,31(10):1123-1125.[2]蒋利君,黎宇,戴盛明.异嗜性抗体对免疫测定⼲扰的研究进展[J].分⼦诊断与治疗杂志,2010(1):68-72.

[3]黄飚,唐炜,⾦坚.免疫分析中的⼲扰物及其排除[J].标记免疫分析与临床,2004,11（3）:177-179.[4]李⾦万,李钰,戴圣明.内源性⼲扰对免疫分析的影响[J].国际医学检验杂志,2010,3(10) :1167 -1169．

[5]王惠欣.免疫测定中内源性蛋⽩质⼲扰的相关问题探讨[J].⿊龙江医药,2010,12(6):970-972.