醒脑静注射液的药效学研究

6):429～431　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　WCJ·PS　2001,16(

醒脑静注射液的药效学研究

张路晗,向金莲,程　睿,高菊珍

云南省药品检验所,云南昆明650011

　　摘要　目的:对醒脑静注射液作为中药急救制剂的药效进行评估;方法:观察醒脑静注射液对小鼠耳廓肿胀、扭体、睡眠时间的影响;对四氯化碳致肝脏损伤大鼠AST、ALT水平的影响;对细菌内毒素致热家兔体温的影响;对8种标准菌株的抑菌效果。结果:醒脑静注射液能明显缩短戊巴比妥钠致小鼠睡眠时间;抑制二甲苯致小鼠耳廓肿胀;减少冰醋酸致小鼠扭体次数;明显抑制细菌内毒素致家兔体温升高;对实验菌株有不同程度的抑制效果;能降低四氯化碳致肝脏损伤大鼠的AST、ALT水平。结论:该药具有兴奋中枢、解热、镇痛、抑菌、抗炎、保肝的药效。

关键词　醒脑静注射液;药效学

中图分类号:R965　　　　　文献标识码:A　　　　　文章编号:1006-0103(2001)06-0429-03

　　醒脑静注射液由麝香、冰片、栀子、郁金组成,为在经典镇惊开窍药物安宫牛黄丸的基础上研制成的中药急救制剂,具有醒神止痉、清热凉血、行气活血、

解毒止痛的作用。对流行性乙型脑炎、肝昏迷、神经系统感染引起的昏迷、抽搐及中毒性脑病有较好疗效。本实验对其在促清醒、解热、镇痛、抗炎、抑菌、保肝等方面的药效学进行了观察。

[CMCC(B)98001]、绿脓杆菌[CMCC(B)10104]。1.3　实验仪器

750干化学分析仪(美国强生);WRY-B热原测温仪(上海药检仪器厂,探头精度0.05℃)。1.4　实验动物

ICR小鼠(昆明医学院天然药物重点实验室,清洁级,♂♀兼用,18～22g,合格证号滇实动证第9806号)。SD种大鼠(清洁级,♂♀兼用,180～220g,50只,合格证号滇实动证第9808号。日本大耳白家兔(普通级,♂♀兼用,1.7～2.5kg,30只,合格证号滇实动证第99003号)。

1　实验材料

1.1　试药

醒脑静注射液(云南省大理药业有限公司,每支10ml,批号20000114);注射用安钠咖原料(上海第十四制药厂);注射用戊巴比妥钠原料(E.MERK);肝安注射液(中日合资湖北峰江氨基酸有限公司,每

瓶250ml,批号990501);注射用赖安匹林(中韩合资扬州一洋制药有限公司,每瓶0.9g,批号990402);AST试剂(批号6218-6886),ALT试剂(美国强生公司,批号73098342);CCl4(广州化学试剂厂,AR,每瓶500ml)。

注射前以精制花生油配制成15%的溶液;细菌内毒素工作标准品(中国药品生物制品检定所,bac-terialendotoxin,BE,60EU·ml-1,批号9911);冰醋酸(AR,每瓶500ml,广州化学试剂厂,实验前以氯化钠注射液配制成0.6%的溶液。

1.2　菌种

金黄色葡萄球菌[CMCC(B)26003]、藤黄微球菌[CMCC(B)28001]、沙门氏菌[CMCC(B)50094]、大肠杆菌[CMCC(B)44103]、生孢梭菌[CMCC(B)64941]、枯草芽孢杆菌[CMCC(B)63501]、白色念珠球菌

作者简介:张路晗,云南昆明,本科,主管药师,从事药检药理。

2　实验方法与结果

2.1　对小鼠睡眠时间的影响

取18～20gICR小鼠40只,♂♀各半,随机分成空白对照组、阳性对照组、高、低剂量组,每组10只,分别尾静脉注射给氯化钠注射液、安钠咖生理盐

-1

水溶液(2mg·ml)、醒脑静注射液3、6倍生理盐水稀释液20ml·kg-1,每天一次,连续给药2d,于末次给药后15min,小鼠每20g体重腹腔注射戊巴比妥钠生理盐水溶液(3mg·ml-1)0.3ml,记录小鼠反正反射消失至恢复的时间,计算各组均值与标准差,进行t检验,与空白对照组比较差异显著性,结果见表1。

表1　醒脑静注射液对小鼠睡眠时间的影响(n=10,x±s)

Table1　EffectofXingnaojinginjectiononsleepperiodofmice(n=10,x±s)

[1]

GroupsNegativecontrolPositivecontrolHighdoseLowdose

Dose/ml·kg-1

20202020

Sleep

min

period/

27.8±6.99.3±5.6＊14.9±5.6＊13.6±9.3＊

　　Comparedwithnegativecontrolgroup:＊P<0.001　　　430

华西药学杂志第16卷

2.2　对细菌内毒素致热家兔体温的影响[2,3,5]

取日本大耳白家兔,♂♀兼用,于实验前连续3次测量体温,每次4h,家兔单独装盒,只固定颈部,探头插入深度约6cm,测温探头整个实验过程中均保持在家兔直肠内;室温保持在20℃。每隔30min记录体温一次,共测8次,选取体温在38.0～39.6℃之间,体温波动不大于0.4℃的家兔28只,随机分成空白对照组、阳性对照组、高、低剂量组,每组7只。实验当日停食2h,相隔30min测量2次体温,取平均值作为初始体温,然后静脉注射致热剂(取细菌内毒素工作标准品30支,每支以2ml氯化钠注射液溶解,取59ml加氯化钠注射液至70.8ml,得25EU·ml-1溶液)1ml·kg-1,于注射致热剂1h后,记录体温,各组分别静脉注射氯化钠注射液、赖氨匹林生理盐

-1

水溶液(0.03g.ml)、醒脑静注射液及其3倍生理盐水稀释液5ml·kg-1(实验所用样品均经热原检查合格),给药后每30min记录体温一次,共测8次,计算各只家兔各个时间的温度与其初始体温的差值,即为体温的变化值,若为负值,计为0℃,计算各组体温变化值的平均值及标准差,进行t检验及校正t检验,与空白对照组比较差异显著性,结果见表2。2.3　对小鼠扭体的影响[2]

18～20gICR小鼠40只,♂♀各半,随机分成空白对照组、阳性对照组、高、低剂量组,每组10只,分别尾静脉注射氯化钠注射液、赖氨匹林生理盐水溶液(7.5mg·ml-1)、醒脑静注射液3、6倍生理盐水稀释液20ml·kg-1,每天一次,连续给药2d,于末次给药后15min,每只腹腔注射0.6%冰醋酸溶液0.3ml,记录注射致痛剂后15min内各组小鼠扭体次数,计算各组小鼠扭体次数平均值及标准差,进行校正t检验,与空白对照组比较差异显著性,结果见表3。

表3　醒脑静注射液对小鼠扭体的影响(n=10,x±s)

Table3　EffectofXingnaojingonthepainsinwrithingmodelinmice(n=10,x±s)

0.05ml致炎,右耳作对照,15min后将小鼠处死,沿

耳廓基线剪下两耳,用8mm直径打孔器分别在同一部位打下圆耳片,称重。每鼠的左耳片重量-右耳片重量即为肿胀度,(空白组肿胀度-给药组肿胀度)/空白组肿胀度为肿胀抑制率,计算各组肿胀抑制率、肿胀度均值与标准差,进行t检验,与空白对照组比较差异显著性。结果见表3。

表4　醒脑静注射液对小鼠耳廓肿胀的影响(n=10,x±s)

Table4　EffectofXingnaojinginjectiononearedemaofmice(n=10,x±s)

GroupsNegativecontrolPositivecontrolHighdoseLowdose

Dose/ml·kg-1Degreeofearedema/gDepressrate/%

20202020

0.0263±0.00490.0126±0.0075＊0.0157±0.0069＊0.0148±0.0078＊

—524044

　　Comparedwithnegativecontrolgroups:＊P<0.001

2.5　抑菌实验

取10×100mm灭菌具硅胶橡胶塞的试管12支,每管中加入无菌肉汤培养基1ml(白色念珠球菌用真菌培养基、生孢梭菌用硫乙醇酸盐培养基),第1管中加入醒脑静注射液1ml,混匀后取出1ml加入第2管,依次类推,直到第10管混匀后取出1ml弃去,即得醒脑静注射液1:2、1:4、1:8、1:16……:1:1056等十个稀释浓度,第11管不加药液接种实验用菌株作为阳性对照,第12管加入醒脑静注射液1ml混匀后取出1ml弃去,此管不接种菌,作为阴性对照。将上述菌株在肉汤培养基中培养18h,新鲜培养物以灭菌生理盐水稀释至10-3浓度,上述各管各接种0.1ml。白色念珠球菌置25℃培养48h,其余置37℃培养24h。若培养基浑浊,表示有菌生长;培养基清亮,表示无菌生长。以最低无菌生长稀释度作为醒脑静注射液的最低抑菌浓度(MIC)。有菌生长计为“+”,无菌生长计为“-”,结果见表5。2.6　对四氯化碳致大鼠肝损伤的影响

取190～210gSD大鼠50只,♂♀各半,随机分成空白对照组、模型对照组、阳性对照组、高、低剂量组,每组10只,分别腹腔注射氯化钠注射液、肝安注射液、醒脑静注射液4、12倍生理盐水稀释液20ml·kg-1,每天给药1次,连续12d,第3天药后1h,除空白对照组外,每鼠背部皮下注射15%CCl4溶液(注射前以精制花生油配制成)2ml·kg,以后每隔3日注射同量CCl4一次,共3次。于第3次注射CCl4后饥饿16h,大鼠眼眶取血,分离血清并检测ALT、AST值。分别计算各组大鼠AST、ALT值平均值及标准差,进行校正t检验,比较各组差异显著性结果见表6。-1

[4]

[3]

Groups

NegativecontrolPositivecontrolHighdoseLowdose

Dose/ml·kg-1

20

202020

[2]

Mumberofwrithes/times35.1±13.711.1±5.5＊19.2±7.36＊21.9±5.8＊

　　Comparedwithnegativecontrolgroup:＊P<0.001

2.4　对小鼠耳廓肿胀的影响

取18～20gICR小鼠40只,♂♀各半,随机分成空白对照组、阳性对照组、高、低剂量组,每组10只,分别尾静脉注射给氯化钠注射液、赖氨匹林生理盐水溶液(7.5mg·ml)、醒脑静注射液3、6倍生理盐水稀释液20ml·kg-1,每天一次,连续给药2d,于末次给药后15min,小鼠左耳前后两面涂抹二甲苯-1

第6期张路晗,等。醒脑静注液的药效学研究　　　431

表6　对CCl4致大鼠肝损伤的影响(n=10,x±s)

Table6　EffectofXingnaojinginjectiononliverinjuryinducedby

ccl4ofmice(n=10,x±s)

GroupsNegativecontrolModelPositivecontrolHighdoseLowdose

Dose/ml·kg-1

2020202020

AST/U·ml-184.6±13.7371.5±164.4＊＊＊146.2±46.4＊＊131.5±57.8＊＊254.3±122.8

ALT/

U·ml-1

兔体温升高,较赖氨匹林起效略晚但维持时间较长,

明显减少冰醋酸致小鼠扭体次数,对二甲苯致小鼠耳廓肿胀有明显抑制作用;对除绿脓杆菌外的几种标准菌株均显示一定的抑菌活性,对枯草芽孢杆菌的抑菌活性最强;降低CCl4致大鼠肝损伤引起的血清AST、ALT值升高,具有兴奋中枢、解热、镇痛、抗炎、抑菌、保肝的药效。

参

考

文

献

53.1±8.3249.7±117.7＊＊＊94.6±52.5＊＊121.7±78.1＊202.6±117.0

　　Comparedwithnegativecontrolgroup:＊＊＊P<0.001;　　Comparedwithmodelgroup:＊＊P<0.01,＊P<0.05

3　讨论

醒脑静注射液为中药急救用药,所以本实验重点考察其对症治疗急症的几个药效学指标,给药给

药剂量为临床用药剂量的10～20倍,且给药时间较短,以求与临床用药时间平行。实验结果显示醒脑静注射液能明显缩短戊巴比妥钠致小鼠睡眠时间;在给药后1～3.5h内能明显抑制细菌内毒素致家

1　李仪奎,王钦茂,陈奇,等.中药药理实验方法学[M].上海:上海

科学技术出版社,1991.3352　徐叔云,卞如濂,陈修,等.药理实验方法学[M].第二版.北京:人

民卫生出版社,1992.7003　陈奇,邓文龙,孙瑞元,等.中药药理研究方法学[M].北京:人民

卫生出版社,1993.277

4　吴丽花,耿宝琴,章荣华,等.小柴胡胶囊抗菌及保肝作用研究[J].中药药理与临床,1999,15(6):35　中华人民共和国国家药典委员会.中国药典[S].二部.北京:化学工业出版社,2000.85收稿日期:2001-03

表2　醒脑静注射液对细菌内毒素致热家兔体温的影响(n=7,x±s)

Table2　EffectofXingnaojinginjectiononrabbitfevercausedbybacterialendotoxin(n=7,x±s)

Groups

NegativecontrolPositivecontrolHighdose

Lowdose

InitialTemperatureaftertemperatureivBEsolution/℃/℃

38.99±0.1640.33±0.1538.76±0.2940.00±0.3939.05±0.2640.38±0.3738.84±0.3040.18±0.45

Temperatevariationafteradministration/℃

30min

1.39±0.220.95±0.27＊＊

1.20±0.161.30±0.16

60min

1.16±0.250.60±0.25＊＊

0.69±0.15＊＊0.89±0.25

90min

1.00±0.360.41±0.23＊＊

0.36±0.24＊＊0.66±0.29

120min

0.75±0.350.30±0.20＊

0.29±0.17＊0.44±0.26

150min

0.49±0.260.20±0.18＊

0.18±0.07＊0.31±0.22

180min

0.36±0.180.21±0.160.12±0.11＊

0.31±0.30

210min

0.20±0.140.13±0.130.04±0.05＊

0.19±0.18

240min

0.11±0.130.12±0.080.016±0.04

0.16±0.15

　　Comparedwithnegativecontrolgroup＊＊P<0.01＊P<0.05

表5　醒脑静注射液的抑菌作用及MIC

Table5　BacteriostaticactivtyofXingnaojinginjectionandMIC

Micro-organismStaphylococcusaureus

MicococcuskyteysSalmonellaapeciesEscherichiacoli

ClostridiumsporogenesBscillussubilisCandidaalbicans

Pseudomonasaeruginosa

DelutedtimesofXingnaojinginjection

2-------+

4+--+--++

8+-+++-++

16+++++-++

32+++++-++

64+++++-++

128+++++-++

256+++++-++

512+++++-++

1024++++++++

Negative--------Positive++++++++

MIC1/21/81/41/21/41/5121/2———

PHARMACODYNAMICSSTUDYOFXINGNAOJINGINJECTION

ZHANGLu-han,XIANGJin-lian,CHENGRui,GAOJu-zhen

YunnanInstituteofDrugControl,Kunming650011,China

　　AbstractOBJECTIVE:Toevaluatetheeffectofxingnaojingfever,decreasedwrithingandinhibitedearedemaofmice,inhibited

injectionasachinesetraditionalemergencydrug.METHODS:ob-therisingofserumALTandASTinducedbyCCl4inrats;andxing-servedperiodofsleep,earedemaandwrithingofmice,rabbitfever,naojinginjectionalsoshowedtheberteriostaticactivity.CONCLU-theactivityofserumALTandASTinrats;andantidermatophytesSION:Thestudyonxingnaojinginjectionprovedthatithadeffectoftestinvitro.RESULT:Experimentsshowedthatxingnaojinginjec-excitationofCNS,antipyretic,anti-inflamatory,analgesic,hepatopro-tionhadevidentlyshortenedthesleepperiodofmice,lowerrabbittectiveandbecteriostatic.　　Keywords　Xingnaojinginjection;Pharmacodynamics　　CLCnumber:R965　　　　　Documentcode:A　　　　　ArticleID:1006-0103(2001)05-0429-03