鸡新城疫的诊断和病毒分离

辫疆李教业　２００６年第４聊　固岛国国围　王洪巧　，岳宏伟　，成回国　进　，赵海源　，唐图　磊　（１．新疆天康畜牧生物技术股份有限公司制药事业部，乌鲁木齐８３０００１；２．新疆哈密地区农　校，哈密８３９００；３．新疆维吾尔自治区畜牧科学院兽医研究所，乌鲁木齐８３００００）　中图分类号：Ｓ８５８．３１文献标识码：Ａ　粘膜增厚、充血，气管内充满大量的粘液，将呼吸道　堵塞。可见病死鸡全身肌肉出血，肝脏、脾脏出血，　肾脏严重出血，肺部充血，呈现很鲜艳的红色，心脏　肿大、出血，心冠脂肪出血。肠道有严重的出血性炎　文章编号：１　００３－－４８８９（２００６）０４—００２４－０４　鸡新城疫是由Ｉ型副粘病毒引起的一种禽类　急性、高度接触性传染病，主要特征是呼吸困难、腹　泻、神经机能紊乱及黏膜和浆膜出血。２０００年以来，　新疆一些养鸡场经常发生以呼吸系统症状、消化系　统症状和神经系统症状为特征的疫病，病鸡表现为　明显的呼吸道症状，流鼻涕、流眼泪，常伸头，张口　症，肠道粘膜出血，盲肠扁桃体肿胀、出血，腺胃乳　头出血，腺胃与肌胃交接处出血，肌胃底部有明显　的出血。卵系膜出血。　１．３病毒的分离和鉴定　１．３．１　病料的采集和处理：分别无菌采集不同时间　呼吸，口角常流出多量黏液，嗉囊内充满液体内容　物，倒提时常有大量酸臭液体从口内流出。体温升　高，拉黄绿色或黄白色粪便，有的鸡出现神经症状，　患病鸡翅、腿麻痹，跛行或站立不稳，头颈向后或向　一病死的鸡气管、气管粘液、肝脏、肾、肺等组织，将采　集的病料组织分别剪碎，按ｌ：５加入ｈａｎｋｓ液（内　含青霉素、链霉素、卡那霉素２　０００ＩＵ）进行研磨，再　经过３次冻融之后，以８０００转，ｍｉｎ离心１０ｍｉｎ取　上清液，将上清液接种于普通营养琼脂和普通营养　肉汤，３７￣Ｃ培养２４ｈ，未见细菌生长。　１．３．２病毒的分离：取细菌检验阴性的上清液，接种　９日龄的ＳＰＦ鸡胚（从济南斯帕法斯家禽有限公司购　人）的尿囊腔，注射剂量为０．１ｍｌ／枚，３７℃孵化，２４ｈ　之前死亡的鸡胚，不收集尿囊液，取２４ｈ之后死亡的　鸡胚，剖检，观察鸡胚变化，无菌收集尿囊液，备检。　１．３．３　ＨＡ和ＨＩ试验：将尿囊液做血凝试验（ＨＡ），　如果ＨＡ效价是阳性者，用鸡新城疫阳性血清（新疆　畜牧科学院兽医研究所禽病研究室提供）、禽流感　阳性血清（购自中国哈尔滨兽医研究所）和ＥＤＳ一７６　抗血清（新疆畜牧科学院兽医研究所禽病研究室提　供）对其做血凝抑制（ＨＩ）试验。　１．３－４致病力试验：将分离的病毒选择尿囊液作ｌ０　倍系列稀释，从最高稀释度开始，每一稀释度接种５　枚ＳＰＦ鸡胚，观察鸡胚变化，记录死亡时间、死亡数　侧扭转，动作失调。产蛋鸡的产蛋量急剧下降，病　鸡群发病急，死亡率高，给养殖户造成严重的经济　损失。为了查明病因，尽快采取有效防治措施，我们　从发病鸡群中的病死鸡中采集病料，进行了病毒分　离和鉴定。现将我们的研究报告如下：　１材料和方法　１．１了解发病情况　２０００年以来，乌鲁木齐市郊区的养殖场发生了　多起瘟病，鸡体温升高，精神沉郁，食欲不振，有的　鸡有流鼻涕、流眼泪症状，鸡口中流出黏液，最突出　的症状是呼吸极度困难，张嘴呼吸，呼吸时有明显　的　音。病程３—７天后，鸡死亡。有的发病鸡没有明　显的症状，突然死亡。病程较长的鸡有神经症状，头　颈向后扭曲，在饮水或吃食时向后倒退，造成饮食　困难，不死亡的病鸡逐渐消瘦，直至死亡。用抗菌　素、病毒唑等药物治疗无效。　１．２剖检变化　将病死鸡剖检，病鸡气管喉头水肿、充血，气管　收稿Ｅｌ期：２００６－０６－０６　量，按Ｒｅｅｄ和Ｍｕｅｎｅｈ法计算病毒半数致死量ＬＤ　购人非免疫鸡６０只，隔离饲养ｌ３天，将分离　的病毒尿囊液进行攻毒试验，试验鸡分成３组，每　团　维普资讯 http://www.cqvip.com

岛锺李教业　２００６年第４搠　组２０只，第一组肌肉注射鸡胚尿囊液０．５ｍｌ／每只，　第二组静脉注射鸡胚尿囊液０．５ｍｌ／每只，第三组为　空白试验对照组。攻毒之后，继续隔离饲养，观察、　２结果　２．１病毒分离和鉴定　２．１．１　将临床怀疑是鸡新城疫的不同鸡场８份组　织接种鸡胚后，接种的鸡胚分别在２２ｈ～１２６ｈ死亡，　记录发病和死亡情况，对病死鸡采集脏器进行细菌　检验和病毒分离。　观察胚体变化结果见表ｌ。　表１　发病鸡组织病料接种鸡胚后胚体死亡时间及病理变化　２．１．２鸡胚尿囊液的ＨＡ和ＨＩ检测。我们对２４ｈ　之前死亡的鸡胚在观察之后弃之，将２４ｈ之后死亡　胚毒的鸡胚收集尿囊液，进行ＨＡ检测，ＨＡ阳性的再用　ＮＤ和ＡＩ标准血清做ＨＩ实验，结果见表２。　表２鸡新城疫分离株的ＨＡ和Ｈｌ检测结果　ＸＪ０３一Ｉ＃Ｌ　ＸＪ０３一Ｉ＃Ｈ　ＸＪ０３一ｌ＃Ｔｒ　ＸＪ０３－２＃Ｔｒｌ　ＸＪ０３—２＃Ｔｒ：ＸＪ０３—３＃Ｌ　ＸＪ０３－４＃Ｈ　ＸＪ０３－４＃Ｌ　２．２致病力检测　２．２．１　毒力测定。将分离的病毒ＸＪＧ一０３一ｌ婀Ｒ（尿　囊液）和ｘＪＧ一０３—２＃Ｔｒ（尿囊液）及ＸＪＧ－０３—３＃Ｋ　（尿囊液）作ｌ０倍系列稀释后，接种鸡胚，记录鸡胚　死亡时间、死亡数量和病变情况，并计算鸡胚ＬＤ∞　及ＥＩＤ∞，结果见表３、表４和表５。　表３　ＸＪ０３－１＃Ｔｒ￣半数致死（感染）量（ＬＤｓｏ￣ＥＩｓＤ∞）的测定结果　按Ｒｅｅｄ和Ｍｕｅｎｃｈ法计算：ｘＪ０３～ｌ＃Ｔｒ的距离比例为０．１６，则ｕ）５０＝１　ｌ６／Ｏ．１ｍｌ。　２．２－２对试验鸡的攻毒结果：用病毒尿囊液对试验　呼吸困难症状，张嘴呼吸，拉黄绿色稀粪，少数病鸡　鸡攻毒后，观察、记录试验鸡发病情况，结果为：两　组试验鸡在接种病毒之后第二天出现精神沉郁，精　神萎顿，饮食欲减退，到第４天以后逐渐出现呼吸　困难症状，到第ｌ０天时，大多数试验鸡出现典型的　头颈扭曲，试验组鸡发病１００％；试验鸡的症状在持　续３～６天后，症状似乎减退，随后又出现症状。而　对照鸡精神良好，无发病症状。　试验组的鸡极度消瘦，体重普遍低于对照组的　国　维普资讯 http://www.cqvip.com

新疆孪筮盐　２００６年第４　ＪＩ同　表４　ＸＪ０３—２＃Ｔｎ株的ＥＩＤ∞的测定结果　病毒稀　释度观察结果　累计结果　鸡胚死亡或病变数无鸡胚死亡或病变数鸡胚死亡或病变（％）鸡胚死亡或病变数无鸡胚死亡或病变数鸡胚死亡或病变（％）　鸡，与对照鸡比较形成鲜明的对照。将病死鸡剖检，　可见心冠脂肪出血，肺部充血，脾脏、肝脏出血，有　肠道粘膜出血。病死鸡的脑部水肿。无菌采集病死　鸡的脑、肝、心、肺等组织，研磨后，接种ＳＰＦ鸡胚，　的鸡腺胃乳头出血，呈现典型新城疫的病理变化，　分离到新城疫病毒。结果见表６。　表６非免疫鸡攻毒试验结果　３小结与讨论　３．１　近年来有些鸡群出现发病急，死亡率高，呼吸　极度困难，同时伴有流鼻涕、流眼泪、口流粘液等症　状，在病理变化上可见肺部充血、出血，全身脏器出　血，这些症状和病理变化容易与禽流感病混淆，在　病指数的测定，但是根据临床症状、病理变化及毒　力的检测和对非免疫鸡的攻毒试验可以推测该病　毒是新城疫的强毒株。　３．３由于新城疫对养鸡业造成巨大的经济损失，我　国对该病采取疫苗接种的方法进行免疫预防，使鸡　临床上难以鉴别。本试验对采集的病料通过试验室　病原分离和血清学鉴定，表明分离病原具有血凝特　新城疫的流行和发生得到有效控制。但仍有一些鸡　群发生新城疫，但死亡率较低，症状不典型，或者在　疫苗免疫之后仍有急性新城疫发生，主要原因是免　疫失败而造成。造成免疫失败的原因主要有：因疫　性，含有血凝素，该血凝素可以被新城疫抗血清特　异性的抑制，不能被禽流感抗血清和ＥＤＳ一７６抗血　清结合，证明引起发病的病原是鸡副粘病毒一Ｉ型。　３．２毒力测定和致病力试验表明，分离的新城疫病　毒的毒力很强。将研磨的病料接种ＳＰＦ鸡胚后第一　代就可导致鸡胚全身出血，胚体脏器出血，病毒　ＥＬＤ∞检测结果最高达到为１０－９．１５，对１３日龄的鸡进　苗抗原含量不足、运输、保存等因素导致疫苗质量　问题；免疫方法不当，例如饮水免疫时时间过长或　过短，或疫苗稀释用水含有消毒剂，如漂白粉造成　对疫苗的破坏，接种灭活油乳剂疫苗时，疫苗接种　行攻毒试验表明发病率为１００％，致死率高达５０％　以上，证实该病原的致病性很强。因为时间的关系，　我们还没有进行本动物的脑内致病指数和静脉致　量不一致，导致疫苗效果不确实或不一致，造成鸡　新城疫散发；缺乏对新城疫免疫抗体的检测，盲目　免疫，导致免疫缺乏和免疫浪费；鸡群自身健康状　况不佳，尤其是一些免疫抑制病如鸡传染性法氏　园　维普资讯 http://www.cqvip.com

辫疆毫旋让　２００６年第４朝　阿苯达唑与阿维菌素　对绵羊胃肠道线虫的防治效果试验　刘福元　，王琳　（１．新疆农业大学兽医专业在职研究生，鸟鲁木齐８３００５２；　２．新疆维吾尔自治区畜牧科学院兽医研究所，鸟鲁木齐８３００００）　摘要：阿苯达唑和阿维茵素都是绵羊胃肠道线虫的主要驱虫药物，在鸟鲁木齐地区此类药用于驱除绵羊胃肠道线虫已有　１０年之久，为了搞清其驱虫效果，进行了阿苯迭唑与阿维菌素对绵羊胃肠道线虫的防治效果试验。　关键词：阿苯达唑；阿维茵素；胃肠道线虫；防治效果　中图分类号：Ｓ８５８．２６文献标识码：Ａ　文章编号：１　００３－４８８９（２ＯＯ６）０４－００２７—０３　业有限公司生产，片剂，批号：２００１０６０８，２００ｒａｇ／片。　阿维菌素长效缓释油胶：浅黄色油胶，由新疆　畜牧科学院兽医研究所与新疆医科大学药学院联　尽管阿苯达唑和阿维菌素都有出现耐药性的　很多报道，但由于多方面的原因，在乌鲁木齐地区：　阿苯达唑因其具有对家畜内寄生虫驱杀效果确实、　速效、低毒、廉价的特点，一直是防治家畜内寄生虫　病的首选驱虫药物：阿维菌素因其具有驱除家畜体　合研制，批号为０３０４２７，ｌＯＯｍｌ／瓶。　阿福丁：无色水样液体，中国农业大学新技术开　发总公司兽药厂生产，批号为２００１０４０２，２０ｍｌ／瓶。　１．２试验动物　选自乌鲁木齐南台子一后备母羊群，品种主要　内和体外寄生虫的作用，使用更加广泛；针对家畜　内寄生虫病反复、持续性感染的特性，为取得较好　的防治效果，也常使用阿维菌素长效缓释剂。为此，　我们用丙硫苯咪唑片剂（即阿苯达唑片剂）、阿福丁　（即阿维菌素）和阿维菌素长效缓释油胶对绵羊胃　肠道线虫进行了防治效果试验，现报告如下：　为杂种哈萨克羊，体重４０—６０ｋｇ。该羊群每年５月中　下旬到９月下旬在南台子山区夏草场自然放牧，其　余时间转至种畜场附近农区茬地放牧，每次转场前　均用阿苯达唑驱虫。　２试验方法　２．１试验动物分组　１试验材料　１．１试验药物　于当年４月下旬随机将羊群分为４组，并对所　有羊只分别编号，每组前５只羊称重。第一组：４０　只，为丙硫苯咪唑组，每只羊按ｌＯｍｇ／ｋｇ体重口服给　药。第二组：３７只，为阿维菌素长效缓释油胶组，每　抗体情况进行设计。一般在７日龄进行首免（Ⅳ　系），在２ｌ一２８日龄进行二免（Ⅳ系），蛋鸡可在　４５—５０日龄进行三免（Ⅳ系）、ｌ１０—１２０日龄接种　油乳剂疫苗，在产蛋期可以进行定期的抗体检测，　丙硫苯咪唑（阿苯达唑）：乌鲁木齐市万年青牧　收稿日期：２００６－４）６－０８　囊、鸡白血病、网状内皮增生症等的感染可以影响　鸡的免疫功能，造成免疫抑制和缺乏。　４对发病鸡场今后采取措施的建议　４．１对发病鸡场进行彻底的消毒。对场内所有用　具、物品、鸡舍和场地进行彻底消毒，控制一段时间　以后再进新的一批鸡进行饲养，并保持圈舍卫生。　根据抗体水平适时补充免疫。　４．３在已经发生疫病的鸡场可以用特异性的抗体　进行治疗。　４．２建立科学的免疫程序。免疫程序应根据不同饲　养管理情况，环境因素，种鸡群的免疫情况及母源　团